聚碳酸酯過濾膜因其物理和化學(xué)性質(zhì),在微生物檢測領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。
一、選擇合適的濾膜
1.根據(jù)待檢測微生物的大小選擇合適的孔徑。通常,細菌和真菌的檢測多選用不同孔徑的濾膜。
2.考慮濾膜的材質(zhì)。聚碳酸酯濾膜具有良好的親水性和透明度,便于觀察和分析。
二、樣品處理
1.確保樣品中的微生物濃度適中,避免過高或過低。過高的濃度可能導(dǎo)致濾膜堵塞,而過低的濃度則可能造成假陰性結(jié)果。
2.對于含有固體顆粒的樣品,建議先進行離心或過濾預(yù)處理,以去除大顆粒雜質(zhì)。
三、過濾操作
1.使用無菌操作臺進行過濾操作,確保環(huán)境無菌。
2.將濾膜放置于無菌過濾器中,并確保濾膜與過濾器貼合緊密。
3.緩慢加入樣品至過濾器中,避免產(chǎn)生氣泡。
4.開啟真空泵,使樣品通聚碳酸酯過濾膜。注意控制抽濾速度,以免損壞濾膜。
四、菌落計數(shù)與鑒定
1.將濾膜無菌轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上,進行菌落計數(shù)和鑒定。
2.根據(jù)菌落的形態(tài)、顏色和生長特性進行初步鑒定。
3.進一步采用生化試驗、分子生物學(xué)方法等對微生物進行準確鑒定。
五、注意事項
1.濾膜在使用前后應(yīng)進行消毒處理,以防止交叉污染。
2.過濾過程中如發(fā)現(xiàn)濾膜破損,應(yīng)立即更換新的濾膜。
3.菌落計數(shù)時應(yīng)遵循無菌操作規(guī)程,避免人為污染。